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pcDNA3.1(+)- Zeo

pcDNA3.1(+)-Zeo是一种常用的原核和真核表达载体,用于将基因插入宿主细胞中进行表达研究。该载体具有多个重要的特点和优势,如高度稳定性、灵活的多克隆位点、广泛的宿主范围和对Zeocin抗性等。

pcDNA3.1(+)-Zeo是一种常用的原核和真核表达载体,用于将基因插入宿主细胞中进行表达研究。该载体具有多个重要的特点和优势,如高度稳定性、灵活的多克隆位点、广泛的宿主范围和对Zeocin抗性等。

首先,pcDNA3.1(+)-Zeo的高度稳定性使其在长期培养和选择中具有较小的丢失率。它包含了宿主细胞中高拷贝数的哺乳动物选择性抗性基因质粒pUC origin和ampicillin resistance。这样,在含有氨苄青霉素(ampicillin)的培养基中,质粒可以快速扩增,并且当细胞分裂时,质粒也会被复制并保留下来,从而保持稳定的选择性。

其次,pcDNA3.1(+)-Zeo具有灵活的多克隆位点。该载体具有多个限制内切酶切位点,方便在不同的位点插入外源基因。此外,它还包含有多个选择性抗性位点,如Zeocin抗性基因。Zeocin是一种能够通过破坏DNA结构杀死细胞的磷酸酶,对多种哺乳动物细胞具有选择性。因此,选用pcDNA3.1(+)-Zeo作为表达载体,可以利用Zeocin进行对抗真核细胞的胁迫选择,选择表达目的基因的细胞。

此外,pcDNA3.1(+)-Zeo适用于多种宿主细胞,包括哺乳动物细胞(如人类、小鼠等)和原核细胞(如大肠杆菌)。这使得该载体具有广泛的应用范围和强大的适应性。对于哺乳动物细胞,表达载体通过细胞质内转染或基因炸弹等方法导入到细胞中;而对于大肠杆菌等原核细胞,通过质粒转化或电转化等方法将载体导入宿主细胞中。

此外,pcDNA3.1(+)-Zeo还具有易损坏的拷贝控制元件(polyadenylation signal),可用于调节转录和翻译效率。它可以通过将基因组DNA的Poly(A)尾部插入到表达载体中,从而影响外源基因在主机细胞中的表达水平。

总体而言,pcDNA3.1(+)-Zeo是一种广泛使用并具有多种优势的表达载体。它的高度稳定性、灵活的多克隆位点、广泛的宿主范围和对Zeocin抗性等特点,使其成为许多基因表达研究中的首选载体。在研究基因功能、蛋白质表达和生物制药等领域中,pcDNA3.1(+)-Zeo提供了一个强大而可靠的工具。

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