橙色嗜热子囊菌-变异盐单胞菌SHMCCD73513-乳酸酚棉蓝染色液
DNA Marker VII用于验证质粒酶切后的片段大小,确保酶切反应的完整性,快速估算DNA片段
在分子生物学实验中,PCR技术的准确性和效率是科研人员关注的重点。Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)以其卓越的高保真性和便捷性,成为了高精度基因扩增实验的理想选择。 Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为高保真DNA扩增而设计。其核心成分是Phusion DNA聚合酶,这种聚合酶融合了Pfu DNA聚合酶的高保真性和Taq DNA聚合酶的高效合成能力,能够在保证高准确性的前提下快速扩增DNA片段。Phusion酶的保真度比普通Taq酶高出约50倍,甚至比Pfu酶更高,特别适合需要高准确性的实验,如基因克隆、突变分析和长片段扩增。 Phusion Master Mix (2×) (Without Dye)的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。此外,无染料配方为后续实验提供了更大的灵活性。
如果使用Goldview等染料,由于灵敏度较低,建议适当增加Marker的上样量。
Tris-硼酸电泳缓冲液(10×TBE)是一种高浓度的缓冲液,广泛应用于核酸电泳实验中,特别适用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳。它由Tris、硼酸和EDTA组成,具有强大的缓冲能力,能够维持稳定的pH值,从而提高电泳的分辨率。产品特性成分:主要由900 mM Tris-硼酸和20 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释10倍后得到的1×TBE工作液含有90 mM Tris-硼酸和2 mM EDTApH值约为8.0。缓冲能力强:适合较长时间电泳,能够维持稳定的pH值,不易出现pH波动。高分辨率:特别适用于分离小于1 kb的DNA片段,能够提供清晰的条带。保存条件:室温保存,有效期长达12个月。使用方法稀释:将10×TBE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释10倍,制备1×工作液。电泳操作:将稀释后的1×TBE缓冲液加入电泳槽中,确保缓冲液完全覆盖凝胶。加样后开始电泳,电泳条件根据实验需求调整。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色。在紫外灯下观察核酸条带。
对于小于500 bp的DNA片段,检测信号可能较弱,建议使用其他染料如SYBR Green I。
在分子生物学和生物医学研究中,荧光定量PCR(qPCR)是基因表达分析和病原体检测的核心技术之一。One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,为研究人员提供了一个高效、防污染且便捷的一步法qPCR解决方案,特别适用于需要快速、准确检测RNA样本的实验场景。 一步法RT-qPCR的优势 传统的RT-qPCR实验通常需要先进行逆转录反应,将RNA转录为cDNA,然后再进行qPCR扩增。这种方法虽然能够获得准确的结果,但操作步骤繁琐,容易引入误差。而One Step RT-qPCR SYBR Green Kit (UDG Plus)采用了一步法设计,将逆转录和qPCR扩增整合到同一个反应体系中,大大简化了操作流程,减少了人为误差,提高了实验的重复性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 UDG技术是该试剂盒的核心亮点之一。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。
在分子生物学实验中,RNA凝胶电泳是一种常用的检测手段,用于分析RNA的完整性。
Gel-Green是一种新型的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。它具有与EB相同的光谱特性,能够在蓝光透射下呈现绿色荧光。产品特性安全性高:Gel-Green是一种油性大分子,不能穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。稳定性高:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 操作简单:与EB用法完全一样,电泳后染色过程只需30分钟且无需脱色或冲洗。使用方法胶染法(推荐方法):制胶时按1:10000比例加入Gel-Green核酸染料(例如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Gel-Green 10,000×储液)。按照常规方法进行电泳。 泡染法:电泳后,将凝胶放入3×染色液中(用0.1 M NaCl溶液将Gel-Green稀释3300倍)。室温振荡染色30分钟。注意事项Gel-Green对玻璃和非聚丙烯材料有一定亲合力,建议在稀释、贮存、染色等过程中使用聚丙烯
其高灵敏度和稳定性使其能够检测低丰度的靶标,即使在样本量有限的情况下也能提供可靠的定量结果。
4S Red Plus 核酸染色剂是一种高灵敏度、低毒性的荧光核酸染料,旨在替代传统的溴化乙锭(EB),广泛应用于琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳中的DNA和RNA染色。 产品特性安全性高:4S Red Plus 是一种油性大分子,分子量约为1,000,无法穿透细胞膜进入细胞内,诱变性远小于EB。Ames测试结果显示,该染色剂的诱变性极低,几乎没有致癌性。灵敏度高:对核酸的迁移影响小于SYBR Green I,能够提供清晰的条带。稳定性好:具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加,无需等待溶液冷却。信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。操作简单:与EB的使用方法相似,无需脱色或冲洗。适用范围广:可选择凝胶染色法和泡染法;适用于琼脂糖凝胶或丙烯酰胺凝胶电泳;可用于dsDNA、ssDNA或RNA染色。经济实惠:单次成本比银染和SYBR Green I低。使用方法胶染法(推荐方法):制备100 mL琼脂糖溶液,加热溶解后冷却至60-70℃。加入10 µL 4S Red Plus 核酸染色剂(10,000×)。轻柔混合(注意排去气泡)后铺胶。
其中,2000 bp条带的浓度最高,约为100 ng/5 µL,其余条带浓度约为50 ng/5 µL
DNA尿素加样缓冲液(2×)是一种专为变性核酸电泳设计的2倍浓缩上样缓冲液,广泛应用于分子生物学实验中。它主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,能够有效解除DNA的二级结构,保持DNA的单链构型。产品特性成分:主要由Tris、EDTA、甘油、尿素等组成,不含溴酚蓝。使用特点:加样后易下沉,便于电泳操作。保存条件:-20℃避光保存,有效期为12个月。用途:仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他非科研用途。使用方法稀释:将2×DNA尿素加样缓冲液与待测核酸样品液按照1:1比例稀释。变性处理:将混合后的样品在95°C水浴中处理5分钟,然后在冰上冷却。电泳操作:将处理后的样品直接加入凝胶加样孔中,进行电泳。注意事项分装使用:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。安全操作:操作时需佩戴实验服和一次性手套,以确保安全。用途限制:本产品仅供科研使用,不得用于临床诊断或其他非科研用途。DNA尿素加样缓冲液(2×)凭借其高效、稳定和清晰的指示特性,成为变性核酸电泳实验中的理想选择。
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