2019-nCoVorf7开放型阅读框片段-变异盐单胞菌SHMCCD73513-乳酸酚棉蓝染色液
优化了反应缓冲体系,能够在短时间内完成高效扩增。其快速热启动Taq酶的扩增效率比普通Taq酶更高
在分子生物学和生物化学研究中,DNA的完整性和准确性对于实验的成功至关重要。Uracil-DNA Glycosylase (UDG),特别是来自大肠杆菌(E. coli)的UDG,是一种能够特异性识别并修复DNA中尿嘧啶(U)的酶。UDG (5U/µl)以其高效的修复能力和精准的特异性,成为了许多实验中不可或缺的工具。 UDG的作用机制 UDG是一种DNA修复酶,能够特异性识别DNA中的尿嘧啶(U),并将其从DNA链中移除。这种酶的作用机制基于其对尿嘧啶的高亲和力。在DNA合成过程中,尿嘧啶可能会由于脱氨反应或其他化学修饰而意外掺入DNA链中。UDG通过识别这些尿嘧啶,并将其从DNA链中切除,从而防止错误碱基的积累。这种修复过程是维持DNA完整性和基因组稳定性的重要机制。 UDG在实验中的应用 PCR反应中的防污染:在PCR实验中,UDG常用于防止引物二聚体的形成和非特异性扩增。通过在PCR反应前加入UDG,可以将引物中的尿嘧啶降解,从而避免引物在反应前的非特异性结合。这种方法被称为“热启动PCR”,能够显著提高PCR反应的特异性和灵敏度。
它不仅简化了实验流程,更提升了实验结果的质量,是分子生物学实验室不可或缺的精准检测利器。
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,准确性和重复性是实验成功的关键。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus)通过整合尿嘧啶-DNA糖基化酶(UDG)技术,提供了一种高效、防污染的qPCR解决方案,确保实验结果的准确性和可靠性。 UDG技术的防污染机制 SYBR Green qPCR Mix (2×, UDG Plus)的核心优势在于其整合了UDG技术。UDG能够特异性识别并降解含有尿嘧啶(U)的DNA,从而防止实验室中残留的PCR产物污染。在qPCR反应开始前,UDG会降解引物或模板中的尿嘧啶,防止非特异性扩增。而在高温变性步骤中(通常95℃),UDG会迅速失活,不会影响后续的qPCR反应。 产品特点 高效防污染:UDG技术能够有效降解含有尿嘧啶的PCR产物,防止实验室中的残留产物污染,从而减少假阳性结果。
SYBR Green qPCR Mix是一种高性能的qPCR试剂,凭借其高灵敏度,为生物学研究的工具
Tris-乙酸电泳缓冲液(50×TAE)是一种广泛应用于核酸电泳的高浓度缓冲液,特别适用于琼脂糖凝胶电泳。它由三羟甲基氨基甲烷(Tris)、乙酸和乙二胺四乙酸(EDTA)组成,能够为核酸电泳提供稳定的pH环境和良好的导电性。产品特性成分:主要由2M Tris-acetate和50 mM EDTA组成。工作液浓度:稀释50倍后的1×TAE工作液含有40 mM Tris-acetate和1 mM EDTA,pH值约为8.0。高效分离:特别适合分离大于13 kb的DNA片段,能够提供更好的分离效果。适用范围广:适用于DNA和RNA的琼脂糖凝胶电泳,尤其在回收DNA片段时表现优异。使用方法稀释:将50×TAE缓冲液用蒸馏水或去离子水稀释50倍,制备1×工作液。电泳:将稀释后的1×TAE缓冲液加入电泳槽中,确保完全覆盖凝胶。根据实验需求调整电泳电压和时间。染色与观察:电泳结束后,使用合适的核酸染料(如EB或Goldview)染色,在紫外灯下观察核酸条带。保存与注意事项保存条件:室温保存,有效期为1年。分装建议:如果每次使用量较小,建议分装后使用,避免反复冻融。
如果凝胶中预先加入 EB,电泳结束后紫外灯下观察时200 bp 以下条带亮度较弱,可通过凝胶后染方法
在分子生物学实验中,长片段DNA的扩增一直是PCR技术的重要挑战。Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)凭借其卓越的长片段扩增能力和预混染料的便捷性,成为了这一领域的理想选择。 Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)是一种专为长片段DNA扩增设计的预混反应体系,其核心成分为Ultra-Long DNA Polymerase。这种聚合酶融合了多种酶的特性,能够在单次反应中高效扩增长达40 kb甚至更长的DNA片段。这种能力使其在基因组学研究、全基因合成以及复杂基因组区域的分析中具有无可比拟的优势。 与无染料版本不同,Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye)在配方中加入了预混染料。这种设计使得实验人员在完成PCR反应后可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液。预混染料不仅节省了操作步骤,还减少了因手动添加缓冲液而导致的误差,提高了实验的重复性和可靠性。此外,染料的加入也便于实验人员在电泳过程中实时观察扩增产物的迁移情况,从而更直观地评估PCR反应的效果。
电泳结束后,使用溴化乙锭(EB)或其他DNA染料染色,然后在紫外灯下观察电泳条带。
在分子生物学实验中,PCR技术是基因扩增的核心工具,而AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye)凭借其快速高效的特性,成为了现代实验室中不可或缺的高效解决方案。 AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye)是一种预配制的高浓度PCR反应体系,专为快速、高效的DNA扩增而设计。其核心成分是一种经过优化的热启动Taq DNA聚合酶,能够在短时间内完成高效的DNA合成。这种酶结合了热启动技术,确保在PCR反应的高温变性步骤中才被激活,从而有效避免非特异性扩增,提高反应的特异性和灵敏度。 该Master Mix的“2×”浓度设计意味着实验人员只需将模板DNA、引物和水加入其中,即可快速配制好反应体系。这种预混液不仅简化了操作流程,还减少了人为误差,确保了反应体系的均一性和稳定性。同时,预混染料的加入使得实验人员可以直接进行凝胶电泳分析,无需额外添加上样缓冲液,进一步提高了实验的便捷性。 AdvanceFast PCR Master Mix (2×) (With Dye)的另一个显著特点是其优化的反应条件。
由于UDG在高温下仍保留部分活性,建议在反应结束后添加尿嘧啶糖基化酶抑制剂(UGI)
在荧光定量PCR(qPCR)实验中,探针法因其高特异性和高灵敏度而被广泛应用于基因表达分析、病原体检测和基因拷贝数变异分析等领域。然而,实验室中的PCR产物污染可能导致假阳性结果,严重影响实验的可靠性。此外,某些qPCR仪器(如部分ABI系列)需要低浓度的ROX参考染料来校正孔间荧光信号的差异。Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)通过整合低浓度ROX校正功能和UDG防污染技术,提供了一种高效、精准且可靠的qPCR解决方案。 低浓度ROX与UDG技术的双重优势 Probe qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)结合了两种关键技术:低浓度ROX参考染料和UDG(尿嘧啶-DNA糖基化酶)防污染系统。低浓度ROX能够有效校正孔间荧光信号的差异,确保荧光定量的准确性,特别适用于需要低浓度ROX的qPCR仪器(如部分ABI系列)。而UDG技术则通过降解含有尿嘧啶的DNA,防止实验室中的PCR产物污染,从而减少假阳性结果,提高实验的可靠性。
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